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分光光度計法測農藥殘留的優點
時間:2019-03-06 點擊次數:2842

農藥殘留的檢測在紫外可見分光光度計、分光光度計檢測方面,已經取得了很大進步,紫外可見分光光度計靈敏度的提高,穩定性的提高給予農藥殘留的檢測能力、檢測限、覆蓋范圍等帶來了非常大的提升。(如雙光束紫外可見分光光度計UV1901PC)具備雙光束光學系統,參比和樣品可同時放入,提高了分析效率和準確性。有利于加強農藥殘留監控力度。同時UV1901PC雙光束紫外可見分光光度計具備單機掃描(隨開機,隨掃描),自動繪制標準曲線(一種殘留元素,只需做一次標準曲線,可儲存于紫外可見分光光度計本機中,使用時調出。方便實用),單機多波長(一個樣品同時測出不同波長的數值。減少實驗時間和操作步驟),動力學等功能(觀察樣品時間上的變化,可長達10個小時)。

 本方法適用于蔬菜、水果、相應食物、水及中毒殘留物中有機類和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測。

一定條件中,氨基甲酸酯類農藥、有機磷對膽堿酯酶有抑制作用,抑制率與農藥的濃度呈正比。用分光光度計測農殘的方法其實是利用酶催化乙酰膽堿水解產物與顯色劑生成黃色物質,其物質在紫外412nm波長處有吸收,可以利用紫外可見分光光度計測定其吸光度隨時間的變化值(使用UV1901PC紫外可見分光光度計動力學功能操作簡便)得出蔬菜中含有機磷或氨基甲酸酯類農殘留量的情況。

 

主要儀器:

分光光度計/紫外可見分光光度計,電子天平,移液槍及配套管嘴,冰箱,超聲波提取儀/萃取儀/處理器(FS-600N)

試劑

PH8.0緩沖溶液  分別稱取11.9g無水磷酸氫二鉀和3.2g磷酸二氫鉀,溶解于1000ml蒸餾水中。

顯色劑    分別稱取160mg5,5-二硫代2-(硝基苯甲酸)(DTNB)15.6mg碳酸氫鈉,溶解于20ml緩沖溶液中,4℃冰箱中保存。

底物   稱取125mg碘化硫代丁酰膽堿,溶解于15ml緩沖液中,搖勻后置4℃冰箱中保存備用。保存期不超過兩周。

丁/乙酰膽堿酯酶 根據酶的活性情況,用緩沖液溶解,3min內的吸光度變化控制在0.4~0.8。搖勻后置4℃冰箱中保存備用。

操作步驟

樣品處理  選取有代表性的蔬菜樣品,沖洗掉表明泥土,剪成1cm左右見方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,手搖振蕩1~2Min,或超聲波振蕩30s,浸出提取液,靜置3~5min,待用。

對照溶液測試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑,再加入2.5ml緩沖溶液,搖勻后于37℃放置15min,加入50ul底物搖勻,此時開始反應并顯色,要立即放入分光光度計/紫外可見分光光度計自動聯樣品池中,記錄反應3min時的吸光度。

樣品溶液測試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑,再加入2.5mL樣品提取液,其他操作與對照溶液測試相同,記錄反應3min的吸光度變化值。

分光光度計法測農藥殘留主要優點:穩定性好,靈敏性高。

 

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